1956年1月7日杜旭东出生于北京，自解放军艺术学院、中央美术学院毕业之后于1989年参演了个人首部电影《老少爷们上法场》正式出道，同年还参演了抗战题材电影《烈火金刚》。1983年杜旭东和与医生刘玉凤通过相亲结识，两人结婚之后于1986年2月8日诞下女儿杜金京。
2000年之前杜旭东相继参演了《北洋水师》、《长天烽火》、《四保临江》、《有话好好说》、《波涛汹涌》、《大宅门》等剧。2000年之后接拍《宅门逆子》、《金手指》、《种啥得啥》、《浪子燕青》；在2005年在潘长江主演的电视剧《别拿豆包不当干粮》中饰演大嘴叉子査宝库，也因为此角色被观众所熟知，名气大噪。
2006——2010年，杜旭东参演《都市外乡人》、《震撼世界的七日》、《新三国演义》、《雪豹》、《国防生》等剧。2013年，杜旭东参演《女儿的青春期》；同年并做客李静主持的综艺节目《超级访问》等节目。
1989年，出演个人首部电影《老少爷们上法场》。1993年，在电视剧《回民支队》中饰演哈少甫。1999年，在姜若瑾执导的电视剧《波涛汹涌》饰演施连志，并担任制片主任；同年在侯勇主演的电视剧《江湖笑面人》中饰演梅青。2000年，在陈宝国、斯琴高娃主演的电视剧《大宅门》中饰演配角韩荣发。
2001年，在李保田主演的电视剧《神医喜来乐》中饰演孟庆和，被观众所熟视。2008年，在电视剧《震撼世界的七日》中饰演邓伯龙。2010年，在央视电视剧《洪湖赤卫队》饰演主角王金标；2013年08月19日，做客李静主持的综艺节目《超级访问》。2014年10月23日，在中国第十届全国电视制片业十佳颁奖礼上获得全国电视剧“十佳演员”。2018年3月2日，2018年中央电视台元宵晚会，刘亮、白鸽、杜旭东、郭金杰、翟美容、祁东、李园园、王磊、梁佳兴表演小品《大屯小事》。
