于和伟在学中学时喜爱歌唱,在学校期内,学习培训一般的他第一年中考分数并不理想化。由于不愿做失业工人,决策补课一年再考。于和伟2次初中升高中后,考试成绩還是不理想化,正好那时候抚顺市儿童师范学院第一年招男孩子,毕业之后能够去中小学当声乐老师。在补课班教师的提议下,进了抚顺市儿童师范学院学声乐。毕业之后,由于爱好文艺,之后考进了抚顺市话剧团。1992年,于和伟考上了上戏。
1999年,于和伟出演本人第一部电视连续剧《曹操》,进而宣布进到娱乐圈。2003年,出演高希希执行导演的抗日剧《历史的天空》。2004年,在情感剧《搭错车》中扮演苏民生。2009年,在古装电视剧《三国》中扮演三国刘备。2011年,搭挡出演电视连续剧《青盲》。2011年,凭着电视连续剧《幸福在路上》得到 南方地区星光盛典最好男艺人奖。2012年5月22日,得到 MSN星月本年度最具使用价值男艺人奖。2014年,出演都市言情剧《下一站婚姻》,并凭着本剧得到 第17届华鼎奖当今主题最好男艺人奖。
2015年8月9日,凭着电视连续剧《下一站婚姻》得到 第17届华鼎奖最好男艺人奖。2017年9月16日,凭着影片《我不是潘金莲》得到 第31届我国电影金鸡奖最佳男主角。2018年,于和伟凭着《大军师司马懿之军师联盟》得到 第24届上海电视节“白玉兰奖”最佳男主角。2019年9月10日,主演的电视剧《人民的正义》启动;同一年,得到 第十七届影片艺术表演学好奖。
2014年12月,于和伟报名参加“天使的微笑”共将爱传送公益慈善摄影展。2015年1月,参加爱心公益接力赛跑,呼吁大家传送文明行为新风系统;9月,赴四川大凉山现场采访本地少水情况,领着采访工作人员们开展高原地区“没有水挑戰”、为少水家中背水,并在微博上即时共享感受,呼吁大伙儿节约水资源,为山区地带的同胞外伸援手;12月29日,参加“母亲水窖爱聚十五年”公益性晚会节目,并被授于“母亲水窖宣传策划使者”头衔。
2016年1月21日,得到 第五届我国公益性节本年度公益性人物奖;7月,于和伟在辽宁抚顺市捐资了二座蒲公英花儿童图书馆。
于和伟在演戏时尤其用心和刻苦钻研,对造型艺术一丝不苟。他表演高超,尽管小鼻子眼睛小的,却令人有一种很信任感的觉得。(王丽坤、搜狐娱乐评)
在电视连续剧《三国》中他充足表演了君主三国刘备沉稳和明智的特性。他的银幕品牌形象丰富多彩而出色,不管参演的是主人公或者女配角、正直還是反派角色、古装剧亦或当代,都让观众们看到了他表演大量的精彩纷呈一面。(高希希、搜狐娱乐评)
在电视连续剧《搜索连》中,他扮演的人物角色摆脱了过去戏剧化的士兵品牌形象,既突显了士兵硬汉子气场的酷帅一面,性情中也不缺风流韵事洒脱,有时候还会继续冒拿出一些小幽默。这类品牌形象在神经紧绷的抗日战争戏中最能体现难能可贵的喜剧效果,另外,也让故事情节更为立体式真正。(搜狐娱乐评)